[討論] Protein 在MALDI-TOF出現dimer

最近使用MALDI-TOF打某個protein 出現了dimer 的現象想問這種狀況是因為為什麼呢會因為不同的細胞培養後純化的關係（比如使用HEK293cell 與CHO cell) 還是本身蛋白質純化後就會有這樣的狀況或是跟protein後面接的tag有關係呢？我是直接買廠商純化後的蛋白上機，並不是自己養細胞完純化。蛋白質是接Fc Dimer 情況是未做過reduction & alkylation，單純加上matrix 直接上機。 --

※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 220.133.82.62 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1610634208.A.679.html

1^F推 Ianthegood: 因為protein會dimerise?01/15 02:32

2^F→ xxtomnyxx: 印象中 Fc 好像本身就容易 dimerize01/15 05:17

有相關paper可以驗證嗎？謝謝 ※ 編輯: janewu945 (49.216.30.174 臺灣), 01/15/2021 09:52:51

3^F推 mgx1024: Fc 有包含 hinge 嗎？ 01/15 18:44

4^F→ xxtomnyxx: 有沒有paper我不知道，這算是經驗吧？之前表現 Fc 和 01/18 12:48

5^F→ xxtomnyxx: Fc fusion protein做western blotting，Fc的lane如果量 01/18 12:48

6^F→ xxtomnyxx: 下多就會在兩倍分子量的位置出線訊號，連SDS-PAGE這種 01/18 12:50

7^F→ xxtomnyxx: 環境它都能dimer了，一般沒denature它應該更容易dimer 01/18 12:50

最新文章