[討論] Protein 在MALDI-TOF出現dimer

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最近使用MALDI-TOF打某個protein 出現了dimer 的現象 想問這種狀況是因為為什麼呢 會因為不同的細胞培養後純化的關係 (比如使用HEK293cell 與CHO cell) 還是本身蛋白質純化後就會有這樣的狀況 或是跟protein後面接的tag有關係呢? 我是直接買廠商純化後的蛋白上機, 並不是自己養細胞完純化。 蛋白質是接Fc Dimer 情況是未做過reduction & alkylation, 單純加上matrix 直接上機。 --
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 220.133.82.62 (臺灣) ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1610634208.A.679.html
1FIanthegood: 因為protein會dimerise?01/15 02:32
2Fxxtomnyxx: 印象中 Fc 好像本身就容易 dimerize01/15 05:17
有相關paper可以驗證嗎?謝謝 ※ 編輯: janewu945 (49.216.30.174 臺灣), 01/15/2021 09:52:51
3Fmgx1024: Fc 有包含 hinge 嗎? 01/15 18:44
4Fxxtomnyxx: 有沒有paper我不知道,這算是經驗吧?之前表現 Fc 和 01/18 12:48
5Fxxtomnyxx: Fc fusion protein做western blotting,Fc的lane如果量 01/18 12:48
6Fxxtomnyxx: 下多就會在兩倍分子量的位置出線訊號,連SDS-PAGE這種 01/18 12:50
7Fxxtomnyxx: 環境它都能dimer了,一般沒denature它應該更容易dimer 01/18 12:50